私醫聯招 普通生物學歷屆題庫｜第 501 題
111 學年度
I. 用重組的 DNA 分子送入細菌
II. 使用限制內切酶切割質體 DNA
III. 從細菌中提取質體 DNA
IV. 將質體 DNA 與非質體 DNA 片段進行氫鍵連接
V. 使用連接酶將質體 DNA 與非質體 DNA 連接
- III, II, IV, V, I
- III, IV, V, I, II
- II, III, V, IV, I
- IV, V, I, II, III
提示
分子選殖必須先「有質體可用」再「切開」再「接上外來片段」，最後才送進宿主；連接酶負責封閉切口。
正確答案
正解：A
詳解
A. 正確。合理流程為：III 先從細菌提取質體 DNA → II 用限制內切酶切開質體 → IV 質體與外來片段先以互補黏端氫鍵配對 → V 連接酶封合形成重組 DNA → I 送入細菌。此順序符合「取得載體→切割→黏合→接合→轉形」的邏輯。
B. 錯誤。此序列把 II（切割質體）放到最後、又讓 I（送入細菌）在接合之前，順序顛倒；未切開的質體無法插入外來片段，也不可能先送入再切割。
C. 錯誤。此序列一開始就用 II 切割，但尚未 III 提取質體 DNA，無質體可切；步驟前後倒置。
D. 錯誤。此序列讓 IV（黏合外來片段）與 V（連接）發生在 III（提取質體）與 II（切割質體）之前，等於在尚未取得並切開載體時就進行接合，不合理。
