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私醫聯招 普通生物學歷屆題庫｜第 625 題

113 學年度

DNA 定序科技從桑格定序 (Sanger sequencing) 經歷巨大的突破演變到次世代測序 (next generation sequencing, NGS)。下列的 NGS 方法中，何者不使用所謂的依合成定序 (sequencing by synthesis) 方法，並且可以直接定序單股 DNA？
  1. 焦磷酸定序法 (Pyrosequencing)
  2. Illumina 定序法 (Illumina sequencing)
  3. 奈米孔定序法 (Nanopore sequencing)
  4. PacBio 定序法 (PacBio sequencing)
提示
找出既非依合成定序、又能直接讀單股 DNA 的方法；奈米孔靠電流訊號讀鹼基。
正確答案

正解：C

詳解
A. 錯誤：焦磷酸定序（Pyrosequencing）屬依合成定序，偵測合成時釋出的焦磷酸。
B. 錯誤：Illumina 定序以可逆終止子邊合成邊定序，屬依合成定序。
C. 正確（為本題答案）：奈米孔定序不依賴合成反應，藉單股 DNA 通過孔道時的電流變化直接判讀鹼基，可直接定序單股 DNA。
D. 錯誤：PacBio（SMRT）為即時偵測聚合酶合成時的螢光，仍屬依合成定序。

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