私醫聯招 普通生物學歷屆題庫｜第 662 題
114 學年度
- 使用 poly-A 尾標記片段，使其能與質體 3' 端互補
- 在引子中加入限制酶辨識位，使 PCR 產物可被酶切後接入質體中
- 利用 RNA 引子提高合成效率與專一性
- 在引子 3' 端添加螢光標記，以便後續偵測轉殖效率
提示
要把 PCR 產物接進質體，通常先讓兩者被同一種酶切出可互補的末端。
正確答案
正解：B
詳解
A. 錯誤。poly-A 尾與質體 3' 端互補的說法不符標準選殖策略；質體接合靠限制酶切位或黏性末端而非 poly-A 配對。
B. 正確。在引子中加入限制酶辨識序列，PCR 產物與質體以同一種限制酶切割後可產生互補的黏性末端，再由連接酶接合，是最常用且有效的定向選殖策略。
C. 錯誤。PCR 使用的是 DNA 引子；RNA 引子並非常規 PCR 設計，也無助於後續與質體接合。
D. 錯誤。3' 端加螢光標記僅利於偵測，且會妨礙延伸與接合，對把產物接入質體沒有幫助。
